Dihydroethidium简称DHE，是最常用的检测细胞内超氧化物阴离子 (•O₂^–)水平的荧光探针。分子式为C₂₁H₂₁N₃，分子量为315.41， 

 ØDihydroethidium可以直接用于活细胞的标记，当DHE被活细胞摄入后，可以在细胞内的超氧化物阴离子(•O₂^–)作用下脱氢，产生ethidium (溴化乙锭)。Ethidium可以和RNA或DNA结合产生红色荧光。当细胞内的超氧化物阴离子水平较高时，产生的ethidium较多，红色荧光就较强，反之则较弱。这样就可以用DHE进行超氧化物阴离子水平的检测。 Ø

 Dihydroethidium本身为蓝色荧光，最大激发波长为370nm，最大发射波长为420nm，脱氢后和RNA或DNA结合产生红色荧光，激发波长为535nm，发射波长为610nm。

本产品适用检测活细胞，并适配荧光成像、荧光酶标仪和流式细胞仪等检测。

1.   配制储液：取320µL DMSO溶解1mg的 DHE，配成10mM的储液，分装-20°C避光密封可保存6个月；

2.   准备细胞，如用流式细胞仪检测，则细胞量需不少于10⁶/ mL;

3.   10mM的DHE探针储液用新鲜培养基稀释1000-2000倍，即5-10µM（常用1-10µM，可根据细胞或用药不同调整）；

4.   以染色液替换培养基继续培养细胞，也可以直接向细胞培养液中加入探针储液，探针终浓度同上；

5.   避光, 37°C孵育30-90min;

6.   新鲜培养基或PBS洗细胞1-2次；

7.   流式细胞仪、荧光酶标仪或荧光显微镜等检测，Ex/Em=518nm/605nm。

Dihydroethidium易在空气中氧化，请尽量避免暴露于空气中。 

Dihydroethidium脱氢后产生毒性较高的ethidium，请注意防护。 

荧光染料易淬灭，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。