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高尔基体绿色荧光探针 Golgi-Tracker Green NBD C6-Ceramide
Catalog Number:
EGY060
Amount:
200μg
Applications:
Reactivity:
产品类型:
Unconjugated
发货周期:
现货
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Catalog Number:
EGY060 Amount:
200μg 产品简介
高尔基体绿色荧光探针Golgi-Tracker Green(NBD C6-CERAMIDE, NBD C6-神经酰胺),分子式:C30H49N5O6, 分子量:575.74。本探针对于环境敏感,在极性的水中荧光信号微弱,但在有机溶剂及脂质等非极性条件下荧光增强.,其最大激发/发射波长为466/536nm,呈绿色荧光信号,可选择性地着染细胞内脂质丰富的高尔基体。
本探针可用于活细胞和固定细胞的Golgi体染色,适用荧光显微镜等成像系统观测分析。
本探针用于研究细胞内脂质转运、鞘磷脂运输与代谢、胆固醇含量、溶酶体形成等高尔基体执行的生物功能。
本产品提供助染Buffer中含有牛血清白蛋白BSA,可与探针形成复合物(NBD C6- Ceramide-BSA),极大地提高了荧光探针在高尔基体的负载,荧光信号得以增强。
试剂盒组份
组 份
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规格
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储存条件
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组份A: Golgi-Green探针
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250 μg
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-20℃,避光
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组份B:助染Buffer
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25 mL
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-20℃
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组份 C: 高品质无水DMSO
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100 μL
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室温 避光 密封
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操作步骤
1. 将100 µL的 DMSO (组分C)加入250µg 的Golgi-Green探针(组分A)中并充分混合,配制成探针原液(100 X),注:可将原液分装小份,并在-20℃保存。避免反复冻融。
2. 取10 µL Golgi-Green探针原液加入到990 µL助染Buffer(组分B)中,配制成终浓度为25µg/mL染色工作液(可在5-50µg/mL之间调整优化,也可于此步加入DAPI或Hochest 33342的核复染剂);
3. 染活细胞时,弃培养基,直接在细胞中加入染色工作液,例如,96孔板中每孔加入100µL染色工作液;
4. 37°C,避光,孵育20-30 min;
5. 除去染色工作液,并加入100 µL /孔的助染Buffer(组分B);
6. 37°C,继续孵育10-15 min;
7. 荧光显微镜或激光共聚焦显微镜下观测,Ex/Em=466/536nm, FITC滤光片检测绿色荧光。观测前,可加入抗荧光淬灭介质或封片剂。
如果染固定细胞或组织样本,则在染色前,将样本用4%甲醛于室温固定20 min,PBS洗2-3次后,再进行加入适量染色工作液浸没样本,按步骤4-7进行染色和观测。
注意:不得使用洗涤剂、去污剂等表面活性剂和含甲醇/丙酮类的固定剂,
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