内质网endoplasmic reticulum（ER)是真核细胞内由膜组成通连的扁平状和管状囊腔的细胞器，其功能是蛋白质和类固醇等脂类的合成。

     内质网红色荧光探针ER-Tracker Red（Glibenclamide BODIPY TR）分子量915.23，是连接了Glibenclamide（格列本脲、优降糖）的荧光化合物，格列本脲可结合到内质网膜ATP-敏感 K+ 通道的磺脲类受体上，从而使内质网着染红色荧光。但格列本脲的药理活性可能影响内质网功能。此外，在某些特殊细胞中磺脲类受体的可变表达可能导致内质网的非特异性标记。

     内质网红色荧光探针ER-Tracker Red可用于活细胞的染色标记，适配荧光显微镜等成像系统，荧光光谱Ex/Em=587/615nm。

1. 配制荧光染色工作液

取分析Buffer(组份B)于37℃预热，将ER-tracker Red（组分A）按1:1000-1:3000比例进行稀释，终浓度为0.3-1µM，例如：10µL荧光探针加入10mL的分析Buffer中。

    2. 内质网的荧光标记

a. 弃细胞培养液，用预热的分析Buffer(组份B) 洗细胞一次，

b. 弃洗液，加入步骤1配制好并预热的染色工作液，置37℃, 5% CO₂培养箱孵育15-30 min。

c. 弃染色工作液，用细胞培养液洗细胞1-2次。

d. 荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观测,

      Ex/Em=587/615nm, 红色荧光信号。 

      如需固定，可以使用4%甲醛37℃固定2 min。然后洗涤液洗涤2-3次，每次5分钟，随后可以进行复染或滴加适当的抗荧光淬灭封片液，最后封片荧光显微镜观测。

      注意：ER-Tracker Red染色的细胞不能用Triton X-100通透，通透处理会导致ER-Tracker的荧光信号消散。