本品由二种即用型荧光染液组成，通过与活细胞、死细胞透膜能力的差异，可将之区分及计数，从而判断细胞活力或药物对细胞的毒性。

组份A  Hoechst33342 是一种细胞膜通透性的DNA小沟结合染料，进入活细胞后，结合细胞核DNA经紫外激发而发出蓝色荧光，凋亡细胞因膜通透性增强、染色质固缩、膜p-糖蛋白泵外排功能下降等因素，与Hoechst33342结合能力增强，因此荧光强度要比正常细胞要高更明亮，

 组份B为Propidium Iodide碘化丙啶不可透过活细胞膜，只能透过膜完整性缺失的死细胞，与之核DNA结合，使死细胞呈红色荧光。

细胞进行双染，可通过荧光成像法和或流式细胞仪将正常细胞、凋亡细胞和坏死细胞区别开来，三群细胞表现分别为：

正常活细胞为蓝/低红（Hoechst33342+/PI-） 凋亡细胞为高蓝/低红（Hoechst33342++/PI-+），

  坏死细胞为低蓝/高红（Hoechst33342-/PI++）。

本品适用于大多数动物细胞染色分析。  

本品操作十分简单和方便，在培养细胞上直接将二种染料加入染色20分钟即可上机检测。

采用荧光成像法，包括荧光显微镜、激光共聚焦和高内涵成像系统的分析直观便捷，常用于快速检测细胞活力/细胞毒性，而用于流式细胞分析操作同样简便，分析结果更加准确。

1. 细胞培养于适当容器（培养皿 培养板等）计数，流式分析细胞数量需达10⁶；

2. 成像法直接染色，在每mL培养液（或PBS或固定液）中加入2～5µL组分A和2～5µL组分B；

流式法，细胞用PBS洗3次，调细胞浓度10⁶/mL，加入10～20µL组分A和2～5µL组分B；

3. 室温、避光、孵育 20 min；

4. 上机检测：

荧光显微镜、激光共聚焦、高内涵成像系统观察、拍照

            Hoechst 33342 紫外激发，标准DAPI滤光片检测蓝色荧光，

Propidium Iodide以488nm激发，标准罗丹明TRITC滤光片检测红色荧光.

        流式细胞仪检测

            Hoechst 33342，以350nm紫外激发，发射波长461nm, DAPI通道检测，

            Propidium Iodide，以488nm激发波长，发射波长617nm   FL2或FL3通道检测。