Actin-Tracker是一类可特异结合细胞骨架的微丝（microfilament），亦称F-肌动蛋白 Actin的荧光探针，由鬼笔环肽或称毒蕈肽(phalloidin)与荧光素偶联而成，与F-Actin有高度亲和力，纳摩尔级可标记细胞骨架微丝产生明亮的荧光，效果优于抗体标记。

Actin-Tracker系列依据偶联的荧光素不同，有多种选择，可与互补的细胞核或其它胞器标记荧光组合使用。

Actin-Tracker系列可以用于动物或植物的培养细胞、固定细胞、组织切片或单独F-肌动蛋白的荧光标记。

Actin-Tracker系列可用荧光显微镜等成像系统、微孔板、荧光光度计和流式细胞仪进行检测，荧光光谱参考表1。

 规格说明：按每张片使用200 μL染色工作液，本原液可用于40-200张片。

注意事项：1. 避免反复冻融，适量分装使用。2. 微量液体使用前离心数秒集液取用。3. 荧光染料易淬灭，尽量避光操作。4. 含极微量有毒性的Phalloidin，使用时戴手套防护。

1. 用室温预热的PBS洗涤细胞爬片或组织切片2次。

2. 细胞爬片或组织切片，用PBS配制的3.7%甲醛溶液，室温，固定15 min。

  注意：甲醇对Actin有破坏作用，不得使用含甲醇的甲醛固定液。

3. 用PBS洗涤样本2~3次，每次5 min。

4. 用含0.1% Triton X-100的PBS通透15 min；

    注意：某些样本需要用丙酮置于-20ºC的玻皿中通透。

5. 用PBS按1:40~1:200的比例稀释Actin-Tracker Green原液，

    例如5 μL~ 25 μL Actin-Tracker Green用1 mL PBS稀释（比例可优化）；

6  稀释后染液中再加入终浓度为1%的BSA（封闭，降低背景），配制成为染色工作液；

7. 每张玻片滴加200 μL的染色工作液，使之浸没样本，室温，避光孵育30~60 min；

   注意：为防止蒸发，孵育时最好将玻片置于温盒中。

6. 用PBS洗2~3次；

7.  荧光显微镜进行观察，荧光光谱参见表1。

  可在样本自然干燥后，加入快速固化抗荧光淬灭的封片剂封片后，于2~6ºC避光可保存6个月。

 （如需标记其它抗体，请于第4步后，先用1%BSA的室温封闭30~45min后标记抗体，然后再进行第5步标Actin）；

 （如需细胞核染色，请于第7步后加入其它荧光的细胞核染料标记后，再进行第6-7步）。