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Actin-Tracker Blue 细胞骨架蓝色荧光探针
Catalog Number:
EGY035
Amount:
200μL
Applications:
Reactivity:
产品类型:
Unconjugated
发货周期:
现货
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Catalog Number:
EGY035 Amount:
200μL 产品简介
Actin-Tracker是一类可特异结合细胞骨架的微丝(microfilament),亦称F-肌动蛋白 Actin的荧光探针,由鬼笔环肽或称毒蕈肽(phalloidin)与荧光素偶联而成,与F-Actin有高度亲和力,纳摩尔级可标记细胞骨架微丝产生明亮的荧光,效果优于抗体标记。
Actin-Tracker系列依据偶联的荧光素不同,有多种选择,可与互补的细胞核或其它胞器标记荧光组合使用。
Actin-Tracker系列可以用于动物或植物的培养细胞、固定细胞、组织切片或单独F-肌动蛋白的荧光标记。
Actin-Tracker系列可用荧光显微镜等成像系统、微孔板、荧光光度计和流式细胞仪进行检测,荧光光谱参考表1。
试剂盒组份
组 份
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EGY035
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荧光光谱Ex/Em
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储存条件
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Actin-Tracker Blue
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200 μL
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400 nm/421 nm 蓝
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-20℃ 避光
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规格说明:按每张片使用200 μL染色工作液,本原液可用于40-200张片。
注意事项:1. 避免反复冻融,适量分装使用。2. 微量液体使用前离心数秒集液取用。3. 荧光染料易淬灭,尽量避光操作。4. 含极微量有毒性的Phalloidin,使用时戴手套防护。
操作步骤
1. 用室温预热的PBS洗涤细胞爬片或组织切片2次。
2. 细胞爬片或组织切片,用PBS配制的3.7%甲醛溶液,室温,固定15 min。
注意:甲醇对Actin有破坏作用,不得使用含甲醇的甲醛固定液。
3. 用PBS洗涤样本2~3次,每次5 min。
4. 用含0.1% Triton X-100的PBS通透15 min;
注意:某些样本需要用丙酮置于-20ºC的玻皿中通透。
5. 用PBS按1:40~1:200的比例稀释Actin-Tracker Blue原液,
例如5 μL~ 25 μL Actin-Tracker Blue用1 mL PBS稀释(比例可优化);
6 稀释后染液中再加入终浓度为1%的BSA(封闭,降低背景),配制成为染色工作液;
7. 每张玻片滴加200 μL的染色工作液,使之浸没样本,室温,避光孵育30~60 min;
注意:为防止蒸发,孵育时最好将玻片置于温盒中。
6. 用PBS洗2~3次;
7. 荧光显微镜进行观察,荧光光谱参见表1。
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