当前位置:产品>蛋白研究产品>WB试剂>产品详情

高分子量蛋白 SDS-PAGE电泳预混胶试剂盒(Tris-Acetate体系)
Catalog Number: E1WP324
Amount: 50次
Applications: Reactivity:
产品类型: Unconjugated
发货周期: 现货
说明书:     PDF
总价格:    200元
选择数量:

-
+

咨询客服
概述
  • Catalog Number:

    E1WP324
  • Amount:

    50次
  • 产品简介


     Tris-乙酸凝胶(Tris-acetate Gels)的变性胶适用于分离高分子量(40kDa-500kDa)蛋白,非变性胶可分离更高分子量(150kDa-1000kDa)的蛋白,其与配套的 Tris-乙酸电泳缓冲液同时使用时,可使高分子量蛋白的达到最佳分离效果。Tris-乙酸凝胶提供pH 8.1环境,可最大限度地减少蛋白质修饰,并产生更锐利的条带。Tris-乙酸凝胶也可以与Tris-甘氨酸非变性电泳缓冲液组合使用,相比Tris-甘氨酸凝胶体系更有效地分离高分子量蛋白。Tris-乙酸凝胶用于高分子量蛋白的免疫印迹、质谱分析、蛋白质翻译后修饰.等研究。

    本品约可配制50块常规尺寸(8cm×8cm、1mm厚)的PAGE胶,即分离胶5mL,浓缩胶1.5mL,适配10、12、15孔加样梳.

  • 试剂盒组份


    组   份

    E1WP324(50T)

    储存条件

    组份A:Tris-乙酸分离胶

    45 mL

    避光 2-8℃

    组份B:Tris-乙酸浓缩胶

    6 mL

    避光 2-8℃

    组份C:Tris-乙酸Gel Buffer 

    25 mL

    2-8℃

    组份D:10%过硫酸铵替代品 APS-S

    5mL

    -20℃

     
  • 试剂盒以外自备仪器和试剂


    可调移液器、垂直板电泳仪、双蒸水

  • 操作步骤


    7%的Tris-乙酸凝胶可替代6-8%的Tris-甘氨酸凝胶,3-8%的Tris-乙酸凝胶可替代4-6%的Tris-甘氨酸凝胶,分离高达200-500kDa,本产品仅供7%的Tris-乙酸凝胶配制。

    1.  参考下表(单张胶的用量)配制下层分离胶

    Tris-乙酸 胶浓度

    7%分离胶

    dH2O

    3.74 mL

     Tris-乙酸Gel Buffer 

    0.33 mL

    Tris-乙酸分离胶

    0.88 mL

    TEMED(自备)

    5 μL

    10% APS-S

    50 μL

    总体积

    5 mL

    事先备好灌胶玻璃板,按dH2O、Buffer、分离胶的顺序配制,最后加入TEMED和APS-S,然后立即灌胶。

    2. 按下表(二张胶的参考用量)配制3.2%上层浓缩胶并在下层胶凝后灌胶

    组分

      3.2%上层浓缩胶(2张)

    dH2O

    2.53 mL

     Tris-乙酸Gel Buffer

    0.20 mL

    Tris-乙酸浓缩胶

    0.24 mL

    TEMED(自备)

    3 μL

    10% APS-S

    30 μL

    总体积(二块胶)

    3 mL

        

    事先备好灌胶玻璃板,按dH2O、Buffer、分离胶的顺序配制,最后加入TEMED和APS-S,然后立即灌胶。

    下层胶凝聚后,在上述混合液中最后加入TEMED和APS-S,然后立即灌胶并插入加样梳。

     

    参考1:Tris-乙酸凝胶电泳的 上样、电泳与转膜方法

         Tris-乙酸凝胶分为变性SDS和非变性Native胶,并适配不同的上样Buffer、电泳Buffer和转膜Buffer,具体操作如下:

    1 电泳样本预处理                               

     

    Tris-乙酸变性SDS电泳

    Tris-乙酸非变性电泳

    样本  

    x μL

    x μL

    上样Buffer

    4×LDS 样本Buffer  2.5 μL

    2×Tris-甘氨酸上样Buffer  5 μL

    1M  DTT(自备)

    0.5 μL

    0

    dH2O 补足至

    10 μL

    10 μL

    热变性

    70℃  10 min

    ---

    2 电泳

     

    Tris-乙酸变性SDS电泳

    Tris-乙酸非变性电泳

    电泳Buffer 

    20 x Tris-乙酸电泳Buffer  25mL

    10 x Tris-甘氨酸电泳Buffer  50 mL

    800×稳定剂

    0.625 mL

    0

    dH2O 补足至

    500 mL

    500 mL

    电压、电流

    150V.  70-90 mA

    150V.  40-45 mA

    电泳时间

    70 min

    2-3 hr

    3  转膜

     

    Tris-乙酸变性SDS电泳

    Tris-乙酸非变性电泳

    转膜Buffer 

    20 x Bis-Tris转膜Buffer  25mL

    20 x Bis-Tris转膜Buffer  25mL

    800×稳定剂

    0.625 mL

    0

    甲醇(自备)

    50 mL/单胶,100mL/双胶

    50 mL/单胶,100mL/双胶

    dH2O 补足至

    500 mL

    500 mL

    膜(自备)

    硝酸纤维素 或 PVDF

    硝酸纤维素 或 PVDF

    电压、电流

    30 V. 220 mA/单张胶

    30V.  220 mA/单张胶

    转膜时间

    60 min

    60 min

     

     

    附: 《蛋白电泳 凝胶选择指南表》

    凝胶体系

    Bis-Tris 体系

    Tris-Glycine 体系          (Tris-甘氨酸)

    Tris-Acetate体系             (Tris-乙酸)

    Tricine体系

    蛋白分离范围

    高分辨、高清晰锐利

    宽分子量范围 (2.5-300 kDa) 

    经典传统

    较宽分子量范围 (6-200kDa)

    高分子量

    分离范围 (30-500 kDa)

    低分子量

    分离范围 (2- 20 kDa)

    产品应用

    变性电泳                              中性 pH 体系                   适用于蛋白质免疫印迹、质谱分析,蛋白质翻译后修饰等对检测灵敏度要求高的应用

    变性或非变性电泳               经典 Laemmli 凝胶体系         常用于检测蛋白分子量,蛋白质免疫印迹、凝胶内染色、适用含去垢剂和高盐的样本

    变性或非变性电泳                  中性 pH 体系                          可更高效地分离、转印和分析高分子量蛋白质                         用于蛋白质免疫印迹、质谱分析、蛋白质翻译后修饰.

    变性电泳                                分离、转印和分析低分子量蛋白质的首选                             用于蛋白质免疫印迹、凝胶内染色.

    适配          上样Buffer

    LDS样本Buffer

    Tris-甘氨酸SDS上样Buffer

    LDS样本Buffer

    Tricine SDS样本Buffer

    Tris-甘氨酸上样Buffer

    Tris-甘氨酸上样Buffer

    适配         电泳Buffer

    MOPS 电泳Buffer  

    适用中高分子量蛋白分离

    Tris-甘氨酸SDS电泳Buffer

    Tris-乙酸电泳Buffer

    Tricine SDS电泳阳极Buffer

    MES 电泳Buffer    

    适用低分子量蛋白分离

    Tris-甘氨酸电泳Buffer

    Tris-甘氨酸电泳Buffer

    Tricine SDS电泳阴极Buffer

  • 保存条件


    4℃

相关推荐

Responsive image
Catalog Number:E1WP32206
Amount:60次
Reactivity:
Applications:    
Swiss-Prot No.
Price:200元
Responsive image
Catalog Number:E1WP317
Amount:1ml
Reactivity:
Applications:    
Swiss-Prot No.
Price:200元
Responsive image
Catalog Number:E1WP32215
Amount:60次
Reactivity:
Applications:    
Swiss-Prot No.
Price:200元