支原体污染是细胞培养过程中普遍存在的问题，对细胞的表型、代谢、基因组表达、药物反应等具有明显影响，但因其污染后细胞或培养基短期内没有明显的肉眼或者镜下可见的变化，常被实验人员忽视。本支原体清除试剂盒能有效改善支原体污染引起的细胞生长状态不佳，增加实验结果的重复性及可靠性，减少实验时间及物质上的损失。细胞支原体污染常规判断方法如下：

1. 曾经生长旺盛的细胞株生长逐渐缓慢；

2. 贴壁生长的细胞株贴壁能力下降甚至不贴壁；

3. 细胞株不能生长到较高密度（>1×10⁶个/mL）；

4. 采用细胞融合技术不能形成B细胞或T细胞杂交瘤；

5. 细胞不能通过有限稀释法形成克隆；

6. 细胞培养上清中可见大量的细胞碎片；

7. 严重感染时，细胞形态发生变化，细胞边缘不规整，细胞内和细胞间颗粒物增多。

1. 该产品常规稀释比例为1：1000，可根据细胞敏感性不同适当调整稀释比例。

2. 细胞密度生长至50%左右时，弃去旧培养基，PBS充分荡洗后，加入新鲜培养基及EnoGeneME^TM支原体去除试剂，使其稀释比例达到1000倍，即每1mL完全培养基中加入EnoGeneME^TM支原体去除试剂 1 μL。处理周期：一日一次，连续处理6-12天。若细胞生长缓慢可将处理频率调整为2日1次。

3. 每日观察细胞状态，一般处理2-3次后即可明显改善。处理过程中及时传代，保证细胞生长密度适中，并更换新的无菌培养皿。

4℃，6个月，-20℃，1年；注意分装保存，避免反复冻融。

1. 鉴于试剂液体体积较小，使用前短暂离心，避免液体挂壁。

2. 处理过程中及时检测支原体，推荐使用PCR方法检测，结果最为准确可靠，并及时冻存细胞。

3. 定期对细胞进行支原体检测。对细胞培养相关试剂和器皿进行灭菌处理，避免引起交叉感染。

4. 该试剂本身具有广谱抑菌性，使用过程中，请不要和其他抗生素同用。