1. 贴壁细胞的消化
1.1 吸去培养液,用无菌的PBS溶液洗涤细胞一次,除去残余的血清。
1.2 加入1-2 ml胰蛋白酶消化液,以消化液能覆盖整个瓶底为准,室温或37℃放置30秒至2分钟。
不同的细胞消化时间有所不同,显微镜下动态监测消化进展。
1.3 待显微镜下观察见细胞明显收缩,吸去胰蛋白酶液,加入含血清的完全培养液终止消化。
1.4 用吸管吸取瓶内培养液,反复吹打瓶壁细胞,形成细胞悬液,用于后续实验。
2. 组织的消化
不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。