细胞周期分析广泛应用于研究肿瘤行为及抑癌基因的机制、监测凋亡、检测由各种物理、化学和生物因素诱发的生长变异，包括：DNA损伤、肿瘤发生机理、抗肿瘤药理，细胞周期检查点的功能分析等。

细胞周期（cell cycle）是指连续分裂细胞从一次有丝分裂结束到下一次有丝分裂结束所经历的整个过程, 常分为G0 / G1期，S期和G2/M期，即：休眠期（G0）, DNA合成前期（G1），DNA合成期（S），DNA合成后期（G2）和 有丝分裂期(M)。

细胞周期各期间的DNA含量发生变化，G0 / G1期的细胞只有一组染色体对，进入S期时DNA开始合成，含量逐渐增加，进入G2/M时DNA含量增加一倍，即含有二组染色体对，在细胞分裂结束时平均分配到两个子细胞中去。因此, 细胞中的DNA含量直接反映细胞所处的周期，可通过检测DNA含量来反映或区分细胞周期的各期，同时反映细胞的增殖状况，此细胞DNA含量的测定方法是分析细胞周期的常用方法。

本品由透膜或非透膜的选择性结合DNA的荧光染料所组成，与细胞DNA结合后发出荧光信号，DNA含量与荧光信号强度成正比，由此可用流式细胞仪检测出细胞DNA含量，从而准确地判断所处的细胞周期和细胞增殖能力（图1），也可以用于多倍体细胞检测。

本品检测凋亡的原理是由于凋亡细胞的染色质固缩、核裂解，产生凋亡小体，细胞的总DNA量降低，于正常G₀/G₁细胞群前出现DNA低染细胞群，即G₁峰前出现亚二倍体峰（sub-G₁），可用流式细胞仪检出细胞凋亡群的荧光信号（图2）。

本品适用于固定细胞的流式分析，以405nm激发，发射波长450/50nm通道检测蓝色荧光，

            图1  细胞周期                                   图2 凋亡细胞

1. 培养细胞计数，每个分析需1×10⁶个细胞，1500～2000rpm，离心5min收集细胞；

2. 细胞用PBS离心洗涤一次，转移置冰上；

3. 缓慢地向细胞滴加200µL～500µL的70％冷乙醇重悬细胞（边滴边轻混匀，防止细胞结团）；

4. 置-20℃固定过夜（12-24h, 可保存数周）；

5. 固定好的细胞3000rpm，4℃离心5min，吸弃乙醇固定液；

6. 加入1mL PBS重悬细胞，1500～2000rpm、4℃离心10min，吸弃PBS；

7. 细胞用1mL周期蓝Buffer重悬，再加入1μL周期蓝工作液（50µg周期蓝加50μL dH₂O溶解），室温、避光、染色30min；

8. 流式细胞仪检测和分析

  上机分析前，将细胞样本轻轻吹打避免结团，或用200目筛网过滤一次；

周期蓝： 405nm激发，450/50nm通道检测蓝色荧光，

分析：用流式细胞仪的相关分析软件进行细胞DNA含量分析。