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即用型 活/死细胞分析试剂盒(Hoechst 33342/SYTOX双染法)
Catalog Number:
EGY0041
Amount:
100次
Applications:
Reactivity:
产品类型:
Unconjugated
发货周期:
现货
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Catalog Number:
EGY0041 Amount:
100次 产品简介
本品由二种即用型荧光染液组成,通过与活细胞、死细胞透膜能力的差异,可将之区分及计数,从而判断细胞活力或药物对细胞的毒性。
组份A Hoechst33342 是一种细胞膜通透性的DNA小沟结合染料,进入活细胞后,结合细胞核DNA经紫外激发而发出蓝色荧光,凋亡细胞因膜通透性增强、染色质固缩、膜p-糖蛋白泵外排功能下降等因素,与Hoechst33342结合能力增强,因此荧光强度要比正常细胞要高更明亮,
组份B为SYTOX不可透过活细胞膜,只能透过膜完整性缺失的死细胞,与之核DNA结合,使死细胞呈绿色荧光。
细胞进行双染,可通过荧光成像法和或流式细胞仪将正常细胞、凋亡细胞和坏死细胞区别开来,三群细胞表现分别为:
正常活细胞为蓝/低绿(Hoechst33342+/SYTOX-), 凋亡细胞为高蓝/低绿(Hoechst33342++/SYTOX-+),
坏死细胞为低蓝/高绿(Hoechst33342-/SYTOX++)。
本品适用于大多数动物细胞染色分析。
本品操作十分简单和方便,在培养细胞上直接将二种染料加入染色20分钟即可上机检测。
采用荧光成像法,包括荧光显微镜、激光共聚焦和高内涵成像系统的分析直观便捷,常用于快速检测细胞活力/细胞毒性,而用于流式细胞分析操作同样简便,分析结果更加准确。
试剂盒组份
组份
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EGY0041
(100 tests)
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EGY0042
(200tests)
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EGY0043
(500tests)
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储存条件
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组 份A: Hoechst 33342
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500µL
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1.0 mL
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5.0 mL
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2~8℃ 避光
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组 份B: SYTOX
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500µL
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1.0 mL
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5.0 mL
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操作步骤
1. 细胞培养于适当容器(培养皿 培养板等)计数,流式分析细胞数量需达106;
2. 成像法直接染色,在每mL培养液(或PBS或固定液)中加入2~5µL组分A和2~5µL组分B;
流式法,细胞用PBS洗3次,调细胞浓度106/mL,加入10~20µL组分A和2~5µL组分B;
3. 室温、避光、孵育20min;
4. 上机检测:
荧光显微镜、激光共聚焦、高内涵成像系统观察、拍照
Hoechst 33342 紫外激发,标准DAPI滤光片检测蓝色荧光,
SYTOX以488nm激发,标准FITC滤光片检测绿色荧光。.
流式细胞仪检测
Hoechst 33342,以350nm紫外激发,发射波长461nm, DAPI通道检测,
SYTOX,以488nm激发, 发射波长520nm,FL1(FITC)通道检测。
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