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025-86616616
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Catalog Number:
EGY030Amount:
5 mg产品简介
DiR iodide全称1,1′-dioctadecyl-3,3,3′,3′-tetramethylindotricarbocyanine iodide (‘DiR′; DiIC18(7))为长链碳菁亲脂性染料，常作为组织、脂质胞器、脂质体等染色标记和示踪剂。
DiR为极性依赖的亲脂性染料，高浓度与质膜结合并沿双层质膜间扩散，而使膜结构均匀着染，膜结构完整时很少进入胞内。染料于水中存在微弱荧光，但与膜分子结合后荧光增强并非常持久。染料的毒性很低对细胞生长和生理没有影响，这些特征使其特别适用于研究：
Ø 神经元长期示踪，追踪神经顺行或逆行；
Ø 细胞-细胞融合和细胞粘附、迁移的标记和示踪；
Ø 在发育过程和细胞移植后的迁移示踪；
Ø FRAP（光漂白后的荧光恢复）法检测膜上的脂质扩散，
Ø 细胞毒性试验（依据膜完整性），
Ø 标记脂蛋白、脂筏等。
DiR 为近红外光谱（图1），干扰少，常用于组织标记、活体内细胞或脂质体的示踪成像。
图1 DiO DiI DiD DiR 荧光光谱
试剂盒组份
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组 份 |
EGY030 |
分子量 |
荧光光谱Ex/Em |
储存条件 |
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DiR iodide |
5 mg |
1013.41 |
750/780 nm 深红 |
-20℃ 避光 密封 |
操作步骤
1. 固定细胞或组织切片的标记
对于已用4%甲醛固定后的细胞或组织切片（戊二醛固定的样本往往会产生高荧光背景，不建议使用），可采用DiR固体染料直接标记染色，方法如下：
1.1 4%甲醛固定好的细胞或组织切片，加PBS pH 7.4， 室温浸没5 min，重复洗三次；不可使用去污剂、促渗剂（如吐温、Triton X-100、NP-40等）和高浓度有机溶剂。
1.2 用枪头直接取固体染料覆盖于样本上，或将染料加DMSO配成1-2.5 mg/mL的高浓度染液，滴数滴于样本上，使之浸没样本，放于湿盒内，
1.3 短染的样本可置37℃，20 min~2 h（自行优化），需要长期染色的样本（如神经元）可置4℃或室温数周时间；
1.4 PBS洗去染液，加抗荧光淬灭剂介质（不宜用甘油）或封片剂，荧光显微镜检测，荧光光谱参考表1
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