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细胞示踪试剂盒 CMFDA (成像法)
Catalog Number: EGY0182
Amount: 5x100µg
Applications: Reactivity:
产品类型: Unconjugated
发货周期: 现货
说明书:     PDF
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概述
  • Catalog Number:

    EGY0182
  • Amount:

    5x100µg
  • 产品简介


    v 本品是监测细胞运动,定位,增殖,迁移,趋化性和侵润的优秀工具,并也用于细胞融合、粘附、多药耐药转运、活力和毒性等细胞生理、药物代谢和安全性的研究。

    v 本品是荧光素氯甲基衍生物,可自由扩散通过活细胞膜进入胞内,通过胞内谷胱甘肽S-转移酶介导的巯基反应,产生膜不渗透的谷胱甘肽-荧光染料复合物,从而使细胞标记上明亮的荧光。

    v 本品操作方便,只需移去培养基,避光孵育30分钟,即可成像观察。

    v 本品产生的荧光信号在细胞内非常稳定,至少持续24-72小时及以上,通常持续3-6代细胞分裂。

    v 本品低毒,对细胞生理代谢没有影响,是细胞分析的理想染料。

    v 本品在胞内生成的荧光染料复合物因含有氨基,可用甲醛或戊二醛固定,标记的细胞或组织可长期储存,并且可以标记抗染料抗体来放大信号。可固定而不影响示踪染色还有助于含有病原体细胞的安全处理和分析。

    v 本系列产品有多种光谱特征可选择,支持多重染色。

    v 本品用于活细胞染色成像分析,与荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、高内涵等成像系统适配。

    v 细胞示踪绿 (5-chloromethylfluorescein diacetate) 分子量MW 464.9,激发/发射波长Ex/Em=492/517nm。

          

  • 试剂盒组份


    组份

    EGY0181

    EGY0182

    储存条件

    组份A  细胞示踪绿 CMFDA

    100 µg

    5 x 100 µg

    -20℃ 避光 干燥

    组份B   无水DMSO

    500µL

    5 x 500µL

    室温 避光 密封

  • 操作步骤


    1、染液配制:每管组份A固体加入组份B DMSO配成1mM(100X)染液,即每管100µg 的CMFDA加200μL的DMSO(或先配成10mM的储液,储液-20℃避光可保存6个月);

    2、染液稀释: 将染液按1:100加到不含血清的培养基中,终浓度为10μM(备注),37°C预热;

    3、细胞染色:将待染细胞更换成上述含染料的无血清培养基,置37°C细胞培养箱孵育染色15-45min,

    4、弃去含染液的培养基,替换为新鲜无染液的培养基,于37°C继续培养30min;

    5、悬浮细胞滴1-2滴于载玻片上,贴壁细胞弃培养基,可滴加抗荧光淬灭剂的介质,

    6、置于荧光显微镜或其它成像系统观察、拍照和分析, 激发/发射波长Ex/Em=492/517nm 绿色荧光。

    如果需要长期保存样本,则可将染好的细胞用PBS洗一次,用4%甲醛固定15min后,封片保存。也可以用免疫组化方法标记抗染料的抗体,放大染料抗原的信号。

    备注: 依据不同细胞类型、观测代数和实验目的,染料的终浓度可为0.5-25μM,长期观测细胞(五代及以上 或三天)时,使用5-25μM较高浓度,短期观测(五代以内)时使用0.5-5μM较低浓度,步骤2采用的10 μM终浓度仅供参考,应根椐具体实验选取优化适合的染料浓度。

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