本试剂盒是用于将抗体或蛋白标记上eFluor荧光探针（种类见附表），本品提供用于微量（100μg）抗体或蛋白的标记试剂，仅1-2小时即可标记完成。

eFluor 琥珀酰亚胺酯是用于eFluor系列荧光标记染料，eFluor系列探针的光谱从紫外到远红，可选范围广，可以覆盖整个可见光谱。所有eFluor 染料都具有优异的水溶性。它们的亲水性使有机溶剂的使用极小化。与常规的染料(如FITC，TRITC，Texas Red，Cy3，Cy5和Cy7)相比，eFluor 染料具有更好的标记性能。eFluor用于标记蛋白质和核酸的高性价比的可替代Alexa Fluor 荧光染料。

1.准备样本（抗体或蛋白）溶液

   抗体或蛋白应保存于磷酸盐缓冲盐PBS pH7.2-7.4中，并尽量使用超滤离心管14000-16000×g，4 ℃离心5min从而浓缩至 1.5-2μg /μL，并尽量避免有硫酸铵、胺盐、BSA、Tris、甘氨酸和NaN₃等防腐剂，如存在这些干扰物，请用PBS透析或蛋白脱盐柱去除。

  按1：9比例将10×标记Buffer（组份A）与浓缩好的抗体液（1.5-2μg/μL）混合。

2. 取eFluor探针（组份B）加入10μL的无水DMSO溶解， 每100μL的抗体液中加入2-3μL的eFluor探针，轻轻吸打几次混匀；

3. 室温，避光，旋转或摇动上述标记混合物30-60min；

4. 将标记混合物转移至超滤离心管中；

5. 14000-16000×g，4 ℃ 离心5min，未标记的染料在管底，标记好的抗体截留于管上；

6. 取1-2μL 标记好的抗体用PBS稀释10-100倍，测OD₂₈₀并计算抗体浓度；

7. 按计算好的抗体浓度加PBS配成1mg/mL的标记抗体，进行后续使用。

   如需长期保存，则再加终浓度1%的BSA、适量防腐剂和甘油，分装小份，-20℃避光，可保存12个月。

附: 可选标记荧光素 或生物素

-20℃ 避光 一年